علوم آزمایشگاهی | Lab sciences

 دوستان همانطور که قبلا هم گفته بودم در این پست نمونه های از انواع سلولها را که با گیمسا رنگ امیزی شده اند را قرار میدهم . در ادامه این پست گلبولهای قرمز - ائوزینوفیل - بازوفیل - مونوسیت - نوتروفیل و لنفوسیتهای طبیعی خونی معرفی شده اند .

موفق باشین

• به علت اینکه عکسها باعث کندی وبلاگ می شوند  عکسها را در  ادامه مطلب قرار دادیم .
• برای دیدن اطلاعات مربوط به هر عکس اشاره گر ماوس را به روی عکس هدایت کنید .
• به علت حذف کردن فایلا توسط یه سرور ایرانی برخی عکس های مربوط به این پست حذف شده اند! چون فایلامون را بایگانی نکرده بودیم و به این سرویس دل بسته بودیم مجبور شدیم...

ازدیاد حساسیتها جز بیماری های خود ایمنی هستند که به چهار دسته (در بعضی تستها 5 دسته)تقسیم بندی میکنند . ازدیاد حساسیت تیپ سه یکی از این ازدیاد حساسیت ها است  که در اثر واکنش های انتی بادی و آنتی ژن ایجاد میشود .

رسوب ایمنو کمپلکسها در مناطق مختلفی از بافتها اتفاق میافتد و میتواند به صورت منتشره و یا محدود ظهور کند .

روماتوئید آرتریت یا التهاب مزمن مفاصل ، یکی از بیماریهای خودایمنی شایع مفاصل است به طوری که 1 تا 2 % افراد جامعه به آن مبتلامیشوند(برای مثال 1.3 میلیون نفر در امریکا مبتلا هستند ) . دسته بندی شرایط بالینی  این بیماری توسط دانشگاه روماتولوژی آمریکا موسوم به ACR انجام شده است . با توجه به تحقیقات این دانشگاه فرد باید حداقل چهار تا از این علائم را داشته باشد تا فرد را کاندیدای روماتوئید بدانیم .

این علائم عبارتند از :

1.      کوفتگی عضلانی (یا سفتی و خشکی) صبحگاهی

2.      ورم و آماس در مفاصل در سه ناحیه یا بیشتر

3.      ورم در مفاصل دستها  ، مچ ها ، MCPs ,PIPs

4.      آماس متقارن (در دو طرف )

5.      بر آمدگی های روماتیسمی

6.      وجود فاکتور  روماتوئید (IGM) در سرم

7.      تغییرات بافت روماتوئید آرتریت در زیر مواد رادیو اکتیو

 

در پست های قبلی در مورد اهمیت کشت باکتری ها صحبت کردیم و نحوه اماده کردن و  کشت انواع محیط هارا برسی کردیم . همانطور که در طبقه بندی محیط های کشت اشاره شد تعدادی از محیط های کشت مصنوعی هستند و خودشان هم به ۳قسمت افتراقی و نگه دارنده و انتخابی تقسیم میشوند . در این قسمت ویژگی های محیط های کشت مصنوعی را مرور میکنیم .

این محیط ها شامل :

• الف) باكتروئيدس بايل اسكولين آگار (BBE)
• ب) آگار خوندار
• ج) محيط BHI
• د) شكلات آگار
• هـ)  Chopped meat broth
• و) كلمبيا CAN آگار با خون
• ز) آبگوشت گرم – منفي
• ح) هكتون اينتريك آگار (HE)
• ط) Kanamycin-Vancomycin Laked rabbit blood agar KVLB
• ي) لونشتين – جانسون
• ك) مك كانكي آگار (Mac conkey agar)
• ل) ميدل بروك آگار و براث Middlebrook agar and broth
• م) فنيل اتيل الكل آگار (PE agar)
• ن) PPLO agar (قبلاً Pleuro pneumonia – Like organism يا PPLO ناميده مي‌شد)
• ص) سابورودكستروز آگار
• ع) آگار انتخابي استرپتوكوك
• ف) تاير – مارتين آگار
• س) تيوگليكولات براث
• ق) محيط تريكوموناس
• ر) گزيلوز – ليزين – دزوكسي كولات آگار (XLD)

مطلب مرتبط :

• آزمایش ادرار
• نکاتی در مورد ازمایش ادرار
• ازمایش ماکروسکوپی ادرار
• ازمایش میکروسکوپی ادرار
• تاریخچه تصویری ازمایش ادرار

 1 تا 15 میلی لیتر از ادرار خوب مخلوط شده را داخل یک لوله سانتریفیوژ یک بار مصرف (درسته که تو کشور ما انجام نمیشود ولی اصولا باید از لوله های یک بار مصرف برای هر ادرار استفاده کرد  ) بریزید . قبل از این عمل برای استفاده از نوار ادرار باید نمونه گرفته شده از بیمار را داخل یک ظرف یک بار مصرف (در کشور ما لیوانهای یک بار مصرف روشن) میریزیم و بعد از مخلوط کردن نوار ادرار را به آن اضافه می کنیم . مشاهدات فیزیکی را انجام دهید . برای 5 دقیقه در دور 1500 تا 3000  Rpm سانتریفیوژ کنید .  به مایع بالایی که بعد از سانتریفیوژ ادرار حاصل میشود سوپرناتانت (supernatant) گفته میشود . با دقت supernatant را از ادرار جدا کنید . دقت داشته باشید که حذف مایع بالایی باید با استانداردهای آزمایشگاهی باشد یعنی نباید بیشتر یا کمتر از مایع بالایی برداشت شود چون علاوه بر اینکه ممکن است باعث ایجاد مشکل برای رسوب شود آزمایش ما را هم از نظر استاندارد های آزمایشگاهی پایین میاورد .از  پیپیت یک بار مصرف ، لوله آزمایش مخصوص و یا از پیپیت برقی برای تلغیظ استفاده شود . در توضیح باید گفت که :  امروزه استفاده از دهان برای کشیدن پیپیت ممنوع است و نباید در هیچ شرایطی (حتی آب) از چنین عملی استفاده کرد . از لوله ای آزمایش استاندارد و مخصوص استفاده کنید .. برای سانتریفیوز از لوله های مخروطی مخصوص و برای ادرار اولیه از لوله های بلند مخصوص استفاده کنید .

بعد از جدا کردن سوپرناتانت(لازم به ذکر است که قبلا از دور ریختن سوپرناتانت باید آزمایش توربیدومتری و یا کدورت سنجی برای اندازه گیری نیمه کمی پروتئنین را انجام داد . در این روش از اسید سولفوسالسیلیک استفاده می شود و در صورت وجود پروتئین در ادرار حلقه سفید رنگی در قسمت های بالایی ادرار تشکیل می شود . در این تست باید دقت کرد که اسید را به ارامی از کنار بریزیم و هیچ گونه حرکتی به لوله ازمایش ندهیم . یعد از آزمایش و گزارش ان به صورت منفی یا تریس و یا ۱ و ۲+  می توان ان را به هم زد .) ، همیشه مقدار کافی از مایع بالایی در لوله باقی میماند (در شرایط استاندارد) به همین خاطر مدتی صبر کنید تا ذرات معلق موجود در مایع باقی مانده هم رسوب کند . یک قطره از رنگ حیاتی مطلوب را به رسوب اضافه کنید .

•  یک قطره از رسوب را روی اسلاید تمیز میریزیم و حدود 30 – 60 ثانیه برای فرونشست رسوبها روی لام صبر میکنیم .

 همانطور که میدانید برسی میکروسکوپی با بزرگنمایی های بزرگ و کوچک انجام میگیرد . میکروسکوپ فاز کنتراست و زمینه تاریک برای مشاهده اجسام رسوبی که دارای خاصیت بازتابی کم هستند (شفاف و مانند زمینه ) مناسب است . هر چند که متخصصان آزمایشگاهی در کشور ما کمتر از این میکروسکوپها استفاده میکنند . با نهایت دقت و فوکس کامل ، اسلاید را برسی کنید و این کار را در تمام اسلاید به صورت کامل ادامه دهید . لبه های لام را برای مشاهده کستها  از دست ندهید .

در LPF(low-power field × 10) 10 ، کستها را شمارش کرده و میانگین بگیرید . و تعداد کستها را در هر میدان گزارش کنید . با دقت زیاد نوع کستها را مشخص کنید . اگر از میکروسکوپ فاز کنتراست اتفاده کنید کستها از نظر پنهان نخواهند ماند .

 برای شناسایی و شمارش تعداد گلبولهای قرمز و سفید و  اپیتلیال سل  از بزرگنمایی زیاد استفاده کنید (*100) . حداقل 10 میدان را برسی کنید و نتایج را به صورت سلول در (High -power field) hpf  بیان کنید .

چند نکته مهم :

• Squamous and transitional  از  بسیاری از نمونه ها ادراری جدا میشود . (transitional cells)
• باکتری ، قارچ و میکروارگانیسم ها و آلودگی باکتریایی باید گزارش شود اگر حداقل از 2+ بیشتر باشد .
• کریستال : وجود کریستالهای غیر نرمال در ادرار باید از نظر شیمیایی شناسایی شود و با تاریخچه بیمار هم خوانی داشته باشد .
• مقدار زیاد مخاط  

برسی های بشتر در :

• بیشتر از 2 سلول اپیتلیالی کلیوی (استوانه ای ) در یک میدان
• کست های پاتولوژیکی
• سلولهای تک هسته ای غیر نرمال مانند urothelial cells
• تکه های بافتی
• کریستالهای پاتولوژیک

بعد از اینکه برسی نمونه پایان یافت ، تمام مراحل شیمیایی ، فیزیکی و میکروسکوپی را مرور کنید و اشتباهات خود را در صورت وجود با استانداردهای آزمایشگاهی صحیح کنید . برای مثال رنج نرمال RBC در ادرار 0-10 RBCs/hpf  ، برای WBC در ادرار 0-10 WBCs/hpf ، و کست هیالین  0-2 hyaline casts/lpf است . نتایج به دست امده حتی اگر پشت سر هم انجام شود متفاوت خواهد بود و بستگی زیادی به نحوه استفاده آزمایشگاه از شرایط استاندارد دارد .

به علت اینکه ادرار متابولیسم تمام بدن را خلاصه میکند و به راحتی در دسترس است نمونه بسیار مناسبی برای برسی های اختلالات سیستم ادراری( و در بعضی اوقات سایر سیتمها) است

هدف از كشت باكتري :

1. باكتري را بتوانيم جدا ايزوله كنيم ( خالص كنيم ) مثلا حيواني كه مبتلا است ( بيمار است ) مي توانيم عوامل بيماريزا را از او جدا كنيم و با شناسايي عوامل بيماريزا پي به ماهيت بيماري ببريم .
2. از كشت باكتريايي كمك مي گيريم براي درمان بيماري ( تست آنتي بيوگرام ) كه در اين تست ها باكتري خالص شده را در اختيار داريم . مي توانيم داروهاي متعدد را روي آن آزمايش كنيم و به هر كدام از داروها جواب داد در مورد انسان و يا دام استفاده كنيم .
3. تهيه واكسن ها : كشت هاي خالص را بدست مي آوريم بعد آنتي ژنهاي آن باكتري ها را جدا مي كنيم و از آنها واكسن تهيه مي كنيم .