در دو پست مجزا در مورد سنجش خونی داروها و همچنین TDM , HPLC با هم بحث خواهیم کرد. هر چند زیاد با رشته های علوم آزمایشگاهی به غیر از یک واحد فارماکلوژی باهاش کاری نداریم ولی یه خاطر روش های آزمایشگاهیش بحث خواهیم کرد .در قسمت دوم اين بخش همراه ما باشيد . منبع : آزمايشگاه رفرانس ايران
چه روش ها و تکنیک های تجزیه ای (آنالیتیک) برای TDM در آزمایش های تشخیص معمولی بکار می رود؟
براي TDM روش هاي مختلفي معرفي شده است از مهمترين آنها مي توان به روش هايFluorescence Immunoassay ، Enzyme Multiplied Immunoassay Techniqu ، Cloned Enzyme Donor Immunoassay، Fluorescence Polarization Immunoassay ، Kinetic Interaction of Microparticles in Solution ، Enzyme Linked Immunosorbent-Assay ، Radioimmunoassay و همچنين روش هاي كروماتوگرافي HPLC,GC-MS را ميتوان نام برد .
نمونه مناسب برای TDM | زمان نمونه برداری برای TDM بسيار مهم است . زمان جمع آوری نمونه بزرگترین منشأ بالقوه خطا در آزمایش های روزمره است.بهترین زمان نمونه گیری قبل از مصرف دوز بعدی می باشد.نگهداری نمونه هم يكي ديگر از عوامل مهم در تست هاي داروئي است . نمونه بايد در دمای 2 تا 8 درجه به مدت 7 روز و 20- درجه به مدت 30 روز نگه داري شود .
مراحل كار با HPLC |كروماتوگرافي مايع را در مطلبي جداگانه به طور كامل شرح داديم و انواع كروماتوگرافي را با ذكر مثال هايي به طور مفصل بحث كرديم براي مشاهده بحث ها در صورت نياز از عنوان وبلاگ استفاده كنيد . پس از استخراج سرم و کالیبراتور و سرم کنترلها نمونه را به دستگاه تزریق کرده و بر اساس زمان بازیابی داروها از ستون خارج شده و پیک دارو توسط کامپیوتر ثبت میشود.منظور از زمان بازیابی(Retention time) زمان خارج شدن هر یک از داروها را از ستون می گویند.ترتیب جدا شدن داروها از ستون به صورت زیر میباشد:
- Primidone : بعد از 1/56 دقيقه
- Phenobarbital : بعد از 2/29 دقيقه
- Butobarbital : (به عنوان استاندارد داخلي) 2/54 دقيقه
- Phenytoin : بعد از 3/52 دقيقه
- Carbamazepie : بعد از 4 دقيقه
نحوه محاسبه غلظت داروها|با کمک نرم افزار دستگاه HPLC سطح زیر منحنی هر پیک دارو را محاسبه میکنیم و با استفاده از فرمول داريم :
فاكتور = سطح زير منحني دارو / سطح زير منحني استاندارد داخلي
